Es hat sich herausgestellt, dass Homocystein ein Indikator kardiovaskulärer Erkrankungen ist. Eine Metaanalyse 27 epidemiologischer Studien zeigte, dass eine Erhöhung der Homocystein-Konzentration um 5 µmol/l das Risiko für kardiovaskulare Erkrankungen bei Männer 1,6-fach und bei Frauen 1,8-fach erhöht. Dieselbe Erhöhung des Risikos wird bei einer Erhöhung der Cholesterinkonzentration um 0,5 mmol/l beobachtet.7 Ebenso werden bei Patienten mit chronischer Nierenerkrankung und kardiovaskulärer Erkrankungen erhöhte Homocystein- Spiegel gefunden. Ursache dafür ist der krankheitsbedingte Funktionsverlust der

Niere, die das Homocystein nicht mehr aus dem Blut herausfiltern kann.1,2,3

Methodik

Kompetitiver Immunoassay.

Zuerst wird mit dem IMMULITE 2000 eine automatische Ein-Schritt Vorbehandlung der Patienten Plasma- oder Serumprobe durchgeführt. Die Probe wird in einem Röhrchen ohne Kugel mit DTT und der S- Adenosyl-L-Homocystein (SAH) Hydrolase inkubiert. Nach dieser 30 minütigen Inkubation wird die so behandelte Probe in ein zweites Röhrchen überführt. Dieses Röhrchen enthält die mit SAH beschichtete Kugel und einen mit alkalischer Phosphatase markierten Antikörper gegen SAH. Während der nun folgenden 30 minütigen Inkubation konkurriert das im Vorbehandlungsschritt gebildete SAH in der Probe mit dem immobilisierten SAH an der Kugel um die Bindungsstellen des mit alkalischer Phosphatase markierten Anti-SAH- Antikörpers. Überschüssiges Enzymkonjugat wird im folgenden Waschschritt entfernt. Im nächsten Schritt wir Substrat zugegeben. Die weiteren Schritte erfolgen wie im Handbuch dargestellt.

Inkubations-Schritte: 2 × 30 minuten. 2

Positionen in der Inkubationskette: 1 Röhrchen zur Probenvorbehandlung; 1 Röhrchen für die Immunreaktion.

Schritt 1: Freisetzung des gebundenen Homocysteins und Umwandlung zum SAH.

Schritt 2: Immunreaktion.

IMMULITE 2000 Homocysteine (PIL2KHO-14, 2007-11-20)

Probengewinnung

Die Verwendung von Heparin- bzw. EDTA-Plasma wird empfohlen. Die Verwendung von Serumproben ist ebenfalls möglich. Das Plasma / Serum muss möglichst schnell von den Blutzellen getrennt werden, da von den Erythrozyten Homocystein synthetisiert wird. Aus diesem Grund sollten die Blutproben bis zur Zentrifugation auf Eis gelagert werden. Diese notwendige Lagerung auf Eis macht die Verwendung von Serumproben schwierig.

Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zur Klärung von lipämischen Proben empfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht die Möglichkeit einer unsachgemäßen Handhabung vor Eintreffen im Labor, daher sind die Ergebnisse mit Vorsicht zu interpretieren.

Die Zentrifugation der Serumproben vor dem völligen Abschluss der Gerinnung kann zu Fibringerinnseln führen. Um fehlerhaften Analysenergebnissen infolge von Gerinnseln vorzubeugen, ist sicherzustellen, dass die Gerinnung vor der Zentrifugation der Proben vollständig abgeschlossen ist. Insbesondere Proben von Patienten unter Antikoagulantien- therapie können eine verlängerte Gerinnungszeit aufweisen.

Blutentnahmeröhrchen von verschiedenen Herstellern können differierende Werte verursachen. Dies hängt von den verwendeten Materialien und Additiven (Gel oder physische Trennbarrieren, Gerinnungsaktivatoren und /oder Antikoagulantien) ab. IMMULITE 2000 Homocystein sind nicht mit allen möglichen Röhrchenvariationen ausgetestet worden. Details der getesteten Röhrchenarten sind dem Kapitel "Alternative Probenarten" zu entnehmen.

Erforderliche Menge: 15 µl Plasma oder Serum.

Lagerung: 14 Tage bei 2–8°C oder 6 Monate bei –20°C.

Hinweise und

Vorsichtsmaßnahmen

Zur In-vitro-Diagnostik.

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